| 可能原因 | 解决方案 |
| 起始投入量过高 | 建议使用 Qubit™ 3.0 进行定量 |
| 扩增循环数偏高 | 根据操作指南推荐方案摸索最佳扩增循环数 |
| 洗脱过程未按照操作指南进行，导致脱靶严重 | 洗脱过程严格按照操作指南要求进行操作 |
| 可能原因 | 解决方案 |
| 起始投入量不准确 | 实际起始投入量偏低，建议使用 qPCR 进行精确定量 |
| 转管时未将反应液全部转出 | 转管时务必将每一步的溶液全部转移至新的反应管 |
| 杂交以及磁珠纯化过程丢弃部分磁珠 | 洗脱过程操作避免过于剧烈，弃上清过程切勿丢失磁珠 |
| 可能原因 | 解决方案 |
| 洗脱过程产生大量气泡 | 移液器使用时需轻柔吹吸混匀，避免进入空气；若产生气泡，可先用移液器将液面上方气泡吸干净后再弃上清 |
| 未更换 PCR 管盖 | 严格按照说明书要求更换 PCR 管以及管盖 |
| 试剂未完全混匀 | 试剂使用前严格按照操作指南要求进行混匀，并置于相应的温度预热 |
| 可能原因 | 解决方案 |
| NEM Fragment Enzyme Mix 使用以及保存不当 | NEM Fragment Enzyme Mix 使用前分装保存，冰盒拿取，避免存放在温度波动较大之处。若该组分存放时间较长导致切割效率降低，可将片段化时间延长 5 min。 |
| 可能原因 | 解决方案 |
| 片段化 DNA 投入量过低 | 酶切产物回收效率在 10% 左右，为保证有足够的酶切产物进行建库，可将足量的原始样本分多管同时进行酶切 |
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可能原因 |
解决方案 |
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起始投入量过量 |
建议使用 Qubit™ 3.0 进行定量 |
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扩增循环数偏高 |
根据操作指南推荐摸索最佳扩增循环数 |
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洗脱过程未按照操作指南进行，导致脱靶严重 |
洗脱过程严格按照操作指南要求进行操作 |
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可能原因 |
解决方案 |
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起始投入量不准确 |
实际起始投入量偏低，建议使用 qPCR 进行精确定量 |
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转管时未将反应液全部转出 |
转管时务必将每一步的溶液全部转移至新的反应管 |
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杂交以及磁珠纯化过程丢弃部分磁珠 |
洗脱过程操作避免过于剧烈，弃上清过程切勿丢失磁珠 |
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可能原因 |
解决方案 |
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洗脱过程产生大量气泡 |
移液器使用时需轻柔吹吸混匀，避免进入空气；若产生气泡，可先用移液器将液面上方气泡吸干净后再弃上清 |
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未更换 PCR 管盖 |
严格按照说明书要求更换 PCR 管以及管盖 |
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试剂未完全混匀 |
试剂使用前严格按照操作指南要求进行混匀，并置于相应的温度预热 |
依赖于自有核酸合成工厂的全流程精准把控，自接收 MRD 订单的第一天启动高通量全自动合成 Probe，第二天依次完成修饰合成、氨解、洗脱定量、质控 (若不符合质控标准，则同步启动重合)、分装等；第三天依次完成重合分装、抽干、分装及 Panel 生产和产品包装发货等；确保 3 个工作日内交付。